Étude des interactions ß-Lactoglobuline bovine: peptides bioactifs et digestibilité in vitro des complexes

Liste des illustrations

• Figure 2.1 : Structure primaire de la β-Lg variant B indiquant la substitution génétique des résidus d’acides aminés dans le variant A (Eigel et al., 1984).
• Figure 2.2 : Représentation schématique de la structure secondaire de la β-Lg variant B (Fox, 1989).
• Figure 2.3 : Structure tertiaire de la β-Lg illustrant la localisation d’une molécule de rétinol dans la cavité hydrophobe (Papiz et al., 1986).
• Figure 2.4 : Schéma illustrant l’enroulement de la chaîne polypeptidique et l’arrangement des éléments structuraux de la β-Lg (Sawyer & Kontopidis, 2000).
• Figure 2.5 : Illustration de l’interface associée à la formation de dimères de β-Lg telle que déterminée par rayons X (Sakurai et al., 2001).
• Figure 2.6 : Position des acides aminés substitués dans les variants A et B de la β-Lg (Botelho et al., 2000).
• Figure 2.7 : Représentation schématique des changements structuraux de la β-Lg en fonction du pH : dimère (A) et octamères (B, C) (Pessen et al., 1985).
• Figure 2.8 : Représentation schématique d’un ligand lié dans la cavité hydrophobe de la β-Lg (Flower et al., 2000).
• Figure 2.9 : Organes du système digestif (Lubey, 2001).
• Figure 2.10 : Représentation schématique de l’action des enzymes pancréatiques (Van Dyke, 1989).
• Figure 2.11 : Assimilation des protéines au niveau de l’intestin (Ganapathy et al., 1994).
• Figure 2.12 : Nomenclature de Schechter et Berger (1967). Le lien peptidique hydrolysé est en position P1-P1’ et les sites d’interactions sur l’enzyme sont identifiés par S1 et S1’.
• Figure 2.13 
• Figure 2.14 : Rôle de l’ACE dans le contrôle de la pression artérielle.
• Figure 2.15 : Représentation schématique de la méthode de Noiseux et al. (2002) utilisée pour étudier les interactions protéine:peptides à l’aide d’une membrane d’ultrafiltration.
• Figure 2.16 : Schéma illustrant les principales composantes d’un appareil ITC.
• Figure 2.17 : Exemple d'un thermogramme (A) et d'un isotherme de liaison (B) obtenus par ITC.
• Figure 2.18 : Représentation schématique du principe d’excitation et d’émission de fluorescence par une molécule.
• Figure 2.19 : Illustration du spectre d’excitation et du spectre de fluorescence d’une molécule.
• Figure 2.20 : Spectres de fluorescence brutes (A) et normalisés (B) de deux molécules M1 et M2 (Ladokhin et al., 2000).
• Figure 2.21 : Principe de la fluorescence à angle droit et de la fluorescence frontale (Karoui et al., 2003b).
• Figure 4.1 : Degree of hydrolysis (%) of β-Lg f15-20 (A), β-Lg f102-105 (B), β-Lg f142-148 (C), β-Lg f9-20 (D), β-Lg f92-105 (E), and β-Lg f139-148 (F) measured after a 2 h pepsic digestion performed at pH 1.9, pH 2.5, and pH 4.0 using different enzyme:substrate ratios (1:200, 1:100, and 1:10).
• Figure 4.2 : Degree of hydrolysis (%) of β-Lg f15-20, β-Lg f102-105, β-Lg f142-148, β-Lg f9-20, β-Lg f92-105, and β-Lg f139-148 measured after a 2 h chymotryptic digestion at pH 8.0 (enzyme:substrate ratio = 1:100).
• Figure 4.3 : Change in RP-HPLC profiles during chymotryptic hydrolysis (enzyme:substrate ratio = 1:100, pH 8.0, 2 h) of β-Lg f139-148.
• Figure 4.4 : Kinetics of release of peptide fragments during pepsic hydrolysis (enzyme:substrate ratio = 1:100, 2 h, pH 2.5) of β-Lg f92-105 (A) and during chymotryptic hydrolysis (enzyme:substrate ratio = 1:100, 2 h, pH 8.0) of β-Lg f92-105 (B) and β-Lg f139-148 (C).
• Figure 4.5 : Degree of hydrolysis (%) of β-Lg f102-105 and β-Lg f92-105 treated separately or in a mixture as measured after either pepsic digestion at pH 2.5 or chymotryptic digestion at pH 8.0 (enzyme:substrate ratio =1:100, 2h).
• Figure 5.1 : Percentage (% ± SD) of peptide bound to β-Lg A determined using the ultrafiltration method.
• Figure 5.2 :
• Figure 5.3 : Heat flow vs. time profiles of 10 μL aliquot injections of a 12.14 mM solution of β-Lg f142-148 into a reaction cell containing a (A) 0.045 mM, (B) 0.09 mM, or (C) 0.45 mM solution of β-Lg A.
• Figure 5.4 :
• Figure 5.5 :
• Figure 5.6 : Titration curves of β-Lg f142-148 in 0.045 mM (A), 0.09 mM (B), and 0.45 mM (C) β-Lg A solutions.
• Figure 6.1 :
• Figure 6.2 : Fluorescence spectra at a λ_ex of 290 nm of phosphate buffer (pH 6.8, 25°C) titrated with the phosphate buffer or free peptide (final concentration of 5 mM).
• Figure 6.3 :
• Figure 6.4 :
• Figure 6.5 :
• Figure 6.6 :
• Figure 7.1 : RP-HPLC profiles of β-Lg A retentate (A) and filtrate (B), β-Lg A:β-Lg f142-148 retentate (C) and filtrate (D) and β-Lg f142-148 filtrate (E).
• Figure 7.2 : HPSEC profiles of β-Lg A (―) and β-Lg A:β-Lg f142-148 complexes (- - -).
• Figure 7.3 : Particle size distribution of β-Lg f142-148 (A), β-Lg A (B) and β-Lg A:β-Lg f142-148 complexes (C) as determined by laser light scattering using a Mastersizer instrument.
• Figure 7.4 : MALDI-TOF MS spectra of β-Lg A (A), β-Lg A:β-Lg f142-148 complexes (B and D), and β-Lg f142-148 (C).
• Figure 7.5 :