| Collection Mémoires et thèses électroniques | |
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| Annexe B Préparation des solutions | ||
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PBS 10 X : 80 g NaCl
2 g KCl
26,8 g Na2HPO4 .7H2O
2,4 g KH2PO4
Dissoudre dans 800 ml d’eau millipore, ajuster le pH à 7.4 avec du HCl. Ajuster à un volume de 1 L et stériliser par autoclavage. Diluer à 1/10 avec de l’eau stérile avant chaque utilisation.
G418 solution (généticine) :
Dissoudre la généticine (No. cat. 11811-031, Gibco) dans l’eau millipore stérile jusqu’à l’obtention d’une concentration finale de 500 mg/ml.
Storage à 4°C.
Sample buffer 2 X : 25 ml 4x Tris-Cl/SDS, pH 6.8
20 ml glycerol
4 g SDS
2 ml ß-mercaptoethanol
1 mg bleu de bromophenol
Compléter avec de l’eau millipore à 100 ml et mélanger.
Storage en aliquots de 1 ml à -70°C.
PMSF 100 mM : Dissoudre 0,017 g dans 1 ml d’éthanol 95 %.
Storage à –20oC.
Tampon de migration pour l’électrophorèse (5X) :
9.0 g Tris
43.2 g Glycine
3.0 g SDS
Compléter à 600 ml avec de l’eau millipore.
Storage à 4°C.
Tampon de transfert pour l’immunobuvardage :
3.0 g Tris
14.4 g Glycine
200 ml Méthanol
Compléter à 1 L avec de l’eau millipore.
Storage à 4°C.
TBS 10X : 180 ml Tris-Cl 1 M (pH 7.6)
246.6 ml NaCl 5 M
Compléter à 900 ml avec de l’eau millipore.
TBS-Tween : 100 ml TBS 10X
Ajouter 900 ml d’eau millipore et 1 ml de Tween-20.
© Cherifa Ayari, 2005
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| Annexe A Préparation des milieux utilisés pour le double-hybride chez la levure |  | Annexe C Vecteurs utilisés pour l’expression de protéines dans le système du double-hybride chez la levure |