Collection Mémoires et thèses électroniques
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Annexe B Préparation des solutions

PBS 10 X : 80 g NaCl

2 g KCl

26,8 g Na2HPO4 .7H2O

2,4 g KH2PO4

Dissoudre dans 800 ml d’eau millipore, ajuster le pH à 7.4 avec du HCl. Ajuster à un volume de 1 L et stériliser par autoclavage. Diluer à 1/10 avec de l’eau stérile avant chaque utilisation.

G418 solution (généticine) :

Dissoudre la généticine (No. cat. 11811-031, Gibco) dans l’eau millipore stérile jusqu’à l’obtention d’une concentration finale de 500 mg/ml.

Storage à 4°C.

Sample buffer 2 X : 25 ml 4x Tris-Cl/SDS, pH 6.8

20 ml glycerol

4 g SDS

2 ml ß-mercaptoethanol

1 mg bleu de bromophenol

Compléter avec de l’eau millipore à 100 ml et mélanger.

Storage en aliquots de 1 ml à -70°C.

PMSF 100 mM : Dissoudre 0,017 g dans 1 ml d’éthanol 95 %.

Storage à –20oC.

Tampon de migration pour l’électrophorèse (5X) :

9.0 g Tris

43.2 g Glycine

3.0 g SDS

Compléter à 600 ml avec de l’eau millipore.

Storage à 4°C.

Tampon de transfert pour l’immunobuvardage :

3.0 g Tris

14.4 g Glycine

200 ml Méthanol

Compléter à 1 L avec de l’eau millipore.

Storage à 4°C.

TBS 10X : 180 ml Tris-Cl 1 M (pH 7.6)

246.6 ml NaCl 5 M

Compléter à 900 ml avec de l’eau millipore.

TBS-Tween : 100 ml TBS 10X

Ajouter 900 ml d’eau millipore et 1 ml de Tween-20.

© Cherifa Ayari, 2005